รายละเอียดสินค้า:
|
ชื่อผลิตภัณฑ์: | ดีเอ็นเอ ไลกาส | 10299ES40: | 40,000 ยู |
---|---|---|---|
10299ES42: | 400,000 U | 10299ES83: | 1,600,000 U |
อินพุต DNA โมล (pmol): | ใส่ DNA(ng)/ [0.66 × ใส่ DNA ความยาวเฉลี่ย(bp)] | แอปพลิเคชัน: | เพื่อการวิจัยเท่านั้น! |
แสงสูง: | 400 U/UL T4 DNA Ligase,การวิจัย T4 DNA Ligase,T4 DNA Ligase รีเอเจนต์ทางชีวเคมี |
Fast T4 DNA ligase (400 U/µL)
Fast T4 DNA Ligase เป็นผลิตภัณฑ์เอนไซม์ตัวเดียวที่สามารถใช้เชื่อมต่อชิ้นส่วนดีเอ็นเอและอะแดปเตอร์ในกระบวนการสร้างห้องสมุด NGSผลิตภัณฑ์ได้รับการตรวจสอบโดยการจัดลำดับปริมาณงานสูงและมีคุณภาพดีเยี่ยมเอนไซม์นี้มีความสามารถในการผูกมัดที่มีประสิทธิภาพสูง ซึ่งเหมาะมากสำหรับการผูกมัดของชิ้นส่วนกรดนิวคลีอิกที่ซับซ้อน เช่น ตัวต่อ Ω ของแพลตฟอร์ม MGIขอแนะนำให้เลือก Hieff NGSTM Ultima DNA Ligation Module (Cat#12604) ซึ่งมีส่วนประกอบหลักคือ Fast T4 DNA Ligase สำหรับลูกค้าที่ไม่ต้องการการปรับระบบ
ชื่อผลิตภัณฑ์ | แมว# | ขนาด |
Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) | 10299ES40 | 40,000 ยู |
10299ES42 | 400,000 U | |
10299ES83 |
1,600,000 U |
รายละเอียดสินค้าเกี่ยวกับFast T4 DNA ligase
Fast T4 DNA Ligase เป็นผลิตภัณฑ์เอนไซม์ตัวเดียวที่สามารถใช้เชื่อมต่อชิ้นส่วนดีเอ็นเอและอะแดปเตอร์ในกระบวนการสร้างห้องสมุด NGSผลิตภัณฑ์ได้รับการตรวจสอบโดยการจัดลำดับปริมาณงานสูงและมีคุณภาพดีเยี่ยมเอนไซม์นี้มีความสามารถในการผูกมัดที่มีประสิทธิภาพสูง ซึ่งเหมาะมากสำหรับการผูกมัดของชิ้นส่วนกรดนิวคลีอิกที่ซับซ้อน เช่น ตัวต่อ Ω ของแพลตฟอร์ม MGIขอแนะนำให้เลือก Hieff NGSTMUltima DNA Ligation Module (Cat#12604) ซึ่งมีส่วนประกอบหลักคือ Fast T4 DNA Ligase สำหรับลูกค้าที่ไม่ต้องการการปรับระบบ
ส่วนประกอบผลิตภัณฑ์ของFast T4 DNA ligase
หมายเลขส่วนประกอบ | ส่วนประกอบ | แมว#/ขนาด | ||
10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
10299-A | Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) | 100 ไมโครลิตร | 1 มล | 4 มล |
10299-B | 10 × T4 DNA Ligase บัฟเฟอร์ | 250 ไมโครลิตร | 5 × 500 ไมโครลิตร | 10 มล |
คำแนะนำ
1. โดยทั่วไปแล้ว ชุดสร้างห้องสมุด DNA กระแสหลักจะไม่ทำให้บริสุทธิ์หลังจากสิ้นสุดการซ่อมแซมและการรักษา A-Tailing และดำเนินการ ligation อะแดปเตอร์โดยตรงโปรดอ้างอิงถึงการจัดเตรียมต่อไปนี้สำหรับระบบปฏิกิริยาวอร์เท็กซ์อย่างทั่วถึง ปั่นชั่วครู่ และฟักเป็นเวลา 15 นาทีที่ 20°C
ส่วนประกอบ | ปริมาตร (ไมโครลิตร) |
ดีเอ็นเอหาง dA | 60 |
10 × T4 DNA Ligase บัฟเฟอร์ | 10 |
50% PEG 6000 | 10* |
อะแดปเตอร์ดีเอ็นเอ | X** |
Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) | 1-5*** |
ddH2โอ | มากถึง 100 |
[บันทึก]:*50% PEG 6000 ไม่มีให้ในชุด คุณต้องเตรียมเอง
**โปรดดูจำนวนอแดปเตอร์ในตารางต่อไปนี้
***จำนวนเร็วสามารถเพิ่ม T4 DNA Ligase ได้ 1-5 ไมโครลิตรตามต้องการ
2. คุณภาพและความเข้มข้นของอะแดปเตอร์ที่ใช้ส่งผลโดยตรงต่อประสิทธิภาพ ligation และผลผลิตของคลังการใช้อแด็ปเตอร์มากเกินไปอาจทำให้อะแด็ปเตอร์ไดเมอร์มากขึ้น ในขณะที่การใช้งานที่น้อยลงอาจส่งผลต่อประสิทธิภาพ ligation และผลตอบแทนของไลบรารีตารางต่อไปนี้แสดงจำนวนอะแดปเตอร์ที่แนะนำซึ่งใช้ในสถานการณ์อินพุต DNA ต่างๆ โดยใช้ชุดนี้
อินพุต DNA |
อะแดปเตอร์: อินพุต DNA (อัตราส่วนกราม) |
อินพุต DNA |
อะแดปเตอร์: อินพุต DNA (อัตราส่วนกราม) |
1 ไมโครกรัม | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
100 ng | 100:1 | 500 หน้า | 400:1 |
[หมายเหตุ]: ใส่ DNA โมล (pmol)≈ ใส่ DNA(ng)/ [0.66 × ใส่ DNA ความยาวเฉลี่ย(bp)].
ขั้นตอนที่ 1: คำนวณจำนวนโมลของ DNA อินพุตสูตร: ใส่ DNA โมล (pmol)≈ ใส่ DNA(ng)/ [0.66 × Input DNA ความยาวเฉลี่ย(bp)];ป้อน DNA โมล (pmol)=100 ÷ (0.66×300) = 0.5 pmol;
ขั้นตอนที่ 2: ตามตารางด้านบน ให้คำนวณจำนวนโมลของอะแดปเตอร์ที่เพิ่มเข้ามาเมื่ออินพุต DNA คือ 100ng อัตราส่วนโมลาร์ของอะแดปเตอร์: DNA อินพุตคือ 100:1 และจำนวนโมลของอะแดปเตอร์ที่เพิ่มเข้าไป=100×0.5 pmol=50 pmol;
ขั้นตอนที่ 3: คำนวณปริมาณการเพิ่มอแด็ปเตอร์ความเข้มข้นของอะแดปเตอร์ = 15 ไมโครโมล/ลิตร (หากคุณใช้อะแดปเตอร์ของบริษัทอื่น คุณต้องกำหนดความเข้มข้นตามคำแนะนำ)ปริมาตรของอะแดปเตอร์ที่เพิ่ม = โมลของอะแดปเตอร์ที่เพิ่ม (50 pmol) ÷ ความเข้มข้นของอะแดปเตอร์ (15 μmol/L) = 3.34 μL (หมายเหตุ: 15 μmol/L = 15 pmol/ μL);
สรุป, ปริมาตรที่เพิ่มอแด็ปเตอร์ได้คือ 3.4 ไมโครลิตร(หมายเหตุ: ปริมาณการเติมสูงสุดของอะแดปเตอร์ไม่เกิน 5 ไมโครลิตร)
สินค้าจัดส่งพร้อมแพ็คน้ำแข็งและสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสองปี
คำจำกัดความของหน่วย
ในระบบปฏิกิริยา ligation ขนาด 20 ไมโครลิตร เมื่อ 6 ไมโครกรัมของ λDNA-Hind Ⅲ ทำปฏิกิริยาที่ 16℃ เป็นเวลา 30 นาที ปริมาณของเอ็นไซม์ที่ต้องใช้ในการแยกชิ้นส่วนดีเอ็นเอมากกว่า 50% ถูกกำหนดให้เป็นหนึ่งหน่วย (U)
ข้อควรระวัง
1. T4 DNA Ligase มีความไวต่อการเปลี่ยนแปลงทางกายภาพเมื่อผสมแล้วให้พลิกหลอดเบา ๆ แล้วเขย่าให้เข้ากันอย่าเขย่าแรง
2. เมื่อใช้เอนไซม์ควรเก็บไว้ในกล่องน้ำแข็งหรืออ่างน้ำแข็ง และควรเก็บที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสทันทีหลังใช้งาน
3.ผลิตภัณฑ์นี้ใช้สำหรับการวิจัยเท่านั้น!
4.เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อกาวน์แล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งเพื่อการปฏิบัติงาน
หากคุณต้องการข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับ Fast T4 DNA ligase (400 U/µL) โปรดติดต่อกับเรา ขอขอบคุณ
ผู้ติดต่อ: Ms Kris
โทร: +8613049739311